尊龙凯时提供的人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM)ELISA试剂盒,旨在用于科学研究,严禁用于医学诊断。该试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)原理。实验中,首先将样品、标准品及HRP标记的检测抗体依次加入预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,经过温育和彻底洗涤后,使用底物TMB进行显色,生成的颜色深浅与样品中adropin(AD)的浓度成正相关。最后,利用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以此计算样品浓度。
试剂盒组成如下:
- 96孔配置:微孔酶标板12孔×8条;标准品03mL*6管;样本稀释液6mL;检测抗体-HRP10mL;20×洗涤缓冲液25mL;底物A6mL;底物B6mL;终止液6mL;封板膜2张;说明书1份;自封袋1个。
- 48孔配置:微孔酶标板12孔×4条;标准品03mL*6管;样本稀释液3mL;检测抗体-HRP5mL;20×洗涤缓冲液15mL;底物A3mL;底物B3mL;终止液3mL;封板膜2张;说明书1份;自封袋1个。
标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。试剂盒应在2-8℃条件下保存,且有效期为6个月。
样品收集、处理及保存方法如下:
- 血清:使用不含热原和内毒素的试管,在操作过程中避免细胞刺激;收集后3000转离心10分钟,迅速分离血清与红细胞。
- 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝剂,3000转离心30分钟后取上清。
- 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
- 组织匀浆:将组织与生理盐水混合后捣碎,3000转离心10分钟取上清。
- 样品保存:如样本未及时检测,应按一次用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融,解冻时保持均匀。
自备物品清单包括:
- 酶标仪(450nm)
- 高精度加样器及枪头(05-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL)
- 37℃恒温箱
操作步骤及注意事项:
- 试剂盒在室温下平衡15-30分钟后使用;未用完的酶标板应密封保管。
- 洗衣液可能出现结晶,稀释时可加热以助溶解。
- 各步骤加样应使用加样器,避免实验误差,推荐控制每次加样时间在5分钟内。
- 每次测定时应做标准曲线,复孔最佳。如样本OD值超出标准品,需进行稀释,计算时应乘以总稀释倍数。
- 封板膜仅限一次性使用,避免交叉污染。
- 操作需严格遵循说明书,以酶标仪读数为判断依据;底物避光保存。
- 所有样品及废弃物应按传染处理。
- 不同批号的试剂成分不得混用。
温馨提示:尊龙凯时提供代测服务,凡购买本公司ELISA试剂盒均可享受免费的ELISA代测服务。详情请咨询销售经理或联系在线客服。