在细胞培养领域，我们通常将细胞分为两类：贴壁细胞和悬浮细胞。贴壁细胞依赖于附着在培养皿上生长，而悬浮细胞则可以在液体培养基中自由漂浮并增殖。看似贴壁细胞才需要关注培养皿的表面特性，如是否需要用胶原蛋白或多聚赖氨酸（poly-L-lysine, PLL）等物质进行包被以增强其附着力。然而，如果你以为悬浮细胞“永远不需要包被”，那可能会被它们轻盈的外表所误导。实际上，在一些关键的实验流程中，悬浮细胞亦可能需要暂时“靠岸”，并依赖包被表面的支持。今天我们来探讨一下：悬浮细胞为何有时需进行包被？包被的具体方法是什么？

什么是多聚赖氨酸（PLL）包被？

多聚赖氨酸（poly-L-lysine, PLL）是一种合成的阳离子多肽，富含氨基基团，整体带有显著的正电荷。由于细胞膜表面通常为负电，因此，PLL能够通过静电作用将细胞“吸附”于表面，广泛应用于：初代神经元、干细胞等难以贴壁细胞的培养；组织切片或细胞爬片染色时的固定；增强某些表面抗体或细胞的结合力。

在贴壁细胞培养中，PLL包被不仅可以提升细胞附着的速度和均匀性，针对悬浮细胞，其主要用于短期的固定以及功能性实验的配合。

悬浮细胞需要包被的常见场景

1. **免疫荧光成像与免疫染色**：在普通培养皿中操作悬浮细胞，很容易在洗涤过程中被移走或漂移，从而影响成像效果。将细胞置于PLL包被的玻片或培养皿中，可实现短暂固定，提升图像的稳定性和信噪比。

2. **电转染后细胞收集**：电转染后的悬浮细胞在恢复期相对脆弱，若直接离心，有可能导致大量活细胞的损失。在PLL包被的培养板中短暂培养4-6小时，让部分细胞贴附后再回收，有助于提升后续转染的效率及活性细胞的比例。

3. **细胞富集与原位功能检测**：部分实验如ELISPOT、细胞毒性检测和代谢产物原位检测（例如乳酸/ATP）都需要在细胞的“原位”观察反应，这要求细胞分布和位置的稳定性，因此常用PLL或细胞外基质进行包被，从而固定悬浮细胞。

4. **悬浮细胞低密度培养中的聚团问题**：在低密度培养（例如稀释后分选、单细胞克隆）中，悬浮细胞可能因漂浮过快而无法有效扩增，或形成异常聚团影响观察。适当的包被能够帮助形成一些“锚点”，减少细胞间的漂浮干扰。

5. **外泌体/病毒收集实验中的细胞定点处理**：在外泌体研究中，为了保持细胞的分泌稳定状态，有时需要在轻度PLL包被条件下固定悬浮细胞，以避免因漂浮密度差异而影响上清产物的一致性。

如何正确使用PLL包被？

包被悬浮细胞并不是为了让它们像贴壁细胞一样长期生长。在大多数情况下，包被的目的是实现实验窗口期的短暂固定、提高操作效率以及成像质量。注意，长期附着可能会改变细胞状态，甚至影响其生物学特性，因此一定要根据实验目的合理设置处理时间和强度。

何时不应使用包被？

并非所有悬浮细胞实验均需进行包被。以下情况应避免使用：
🚫 **长期培养的悬浮细胞**：如293F在生物反应器中的培养，不应加包被，且应使用低附着力的培养皿（如聚HEMA处理）。
🚫 **需要完全无附着状态的实验**：在免疫学中某些流式功能检测或抗体介导的细胞毒性测试中，包被会影响结果的真实性。

总结

悬浮细胞在某些情况下也需“靠岸”。为了提升成像效果、细胞收集、固定或维持操作稳定性，适当的表面包被（如PLL）在关键环节中能够显著提高实验成功率与数据质量。但要记住，悬浮细胞并非永远漂浮，科学实验需要根据具体情况灵活应对，而包被正是其中一个重要的技巧。选择尊龙凯时的产品，可以为你的生物医学实验提供更加稳固的支持和更优质的数据。