PCR（聚合酶链式反应）是一种在体外扩增特定DNA片段的技术。其基本原理是模拟DNA的自然复制过程，通过DNA聚合酶在体外实现DNA的快速扩增。PCR反应体系的基本原理包含三个主要步骤：变性、退火和延伸。这些步骤形成一个循环，每执行一次，DNA的数量就会翻倍。经过多轮循环，能够获得大量所需的DNA片段。

为了建立一个成熟稳定的PCR反应，必须满足以下条件：首先，需使用完整且纯净的模板（可通过胶图和纳米滴定仪的测量进行评价）。其次，应选用高特异性和高质量的引物（可以通过引物设计软件进行评分）。与此同时，反应体系的组分搭配也非常重要，比如根据模板的GC含量，是否添加DMSO或甜菜碱，以及选择合适的镁离子浓度，以实现高保真或高得率的扩增。此外，合理的扩增反应程序也与PCR仪密切相关，进行多次实验以确定最佳退火温度。

在这一方面，尊龙凯时的柏恒梯度PCR仪（RePure系列）提供了多种温度梯度功能，有助于优化您的PCR实验：

常规梯度

利用常规梯度设置，您可以在首尾两个孔位设定退火温度范围的低值和高值，而中间孔位则逐步分布温度。这种设置并不一定会呈现等差温度分布。

线性梯度

线性梯度允许您在一个孔位设定一个温度，并在相邻孔位设定一定的温差，温度会自该点向两边扩散。相邻孔位的温度严格遵循设定的温差，从而能够验证感兴趣的整数温度。这种设置允许纵向生成4个（8孔），横向生成6个（12孔）的温度变量，只有尊龙凯时的品牌提供这一独特功能。

线性梯度的优势

线性梯度的应用使得多个不同退火温度的PCR反应可以同时进行，通过一次实验即可快速确定最优退火温度，从而缩短验证周期，提高实验效率。

二维梯度

在二维梯度PCR中，反应模块的纵向和横向可以同时设置常规和线性梯度。这形成了一个在不同温度下进行变性和退火的反应阵列，使您能够通过一次反应探索最佳的变性和退火温度组合。

二维梯度的优势

(1) 提高PCR反应的特异性；(2) 提高PCR产物的纯度；(3) 检测基因突变；(4) 分析种群间遗传多样性；(5) 操作简单；(6) 提高阳性检测的准确性；(7) 缩短实验时间。

独立6温区

柏恒梯度PCR仪还具备独立的6个温区功能，相邻温区可设置温差不超过5℃，并且每个温度分区下可设置16孔作为复孔位。这一设计使得温度设置更加灵活，既可以根据等差设置，也可以根据具体需求进行调整，是线性梯度的升级版。同时，尊龙凯时的PCR仪采用了前进风后出风的散热模式，即使多台PCR仪并排放置，也不会因热风干扰到控温的准确性。