植食性昆虫在与寄主植物长达4亿年的共同进化过程中,演变出多种机制以调控寄主植物的防御,其中唾液中的效应分子是其重要“武器”。目前已知的昆虫唾液效应分子大多为蛋白质和小分子化合物,而小RNA(sRNAs)在基因表达调控中起着关键作用。然而,sRNAs作为昆虫唾液效应分子对植物防御的调控作用尚未明确。烟粉虱(Bemisia tabaci)是一种对农业具有重大威胁的多食性害虫,能导致全球农业产量的严重损失。研究发现,烟粉虱的sRNAs存在于番茄的韧皮部,但其具体功能仍不清楚。为此,研究团队在《MolPlant》上发表了一项题为“AsmallRNAeffectorconservedinherbivoreinsectssuppresseshostplantdefensebycross-kingdomgenesilencing”的研究,旨在探索烟粉虱唾液中的miRNA是否能作为效应分子调控植物防御,从而揭示昆虫与植物相互作用的新机制。
1. 烟粉虱miRNA的鉴定:研究发现,在烟粉虱的唾液腺中,BtmiR29-b的表达水平较高,且在成年烟粉虱中的表达高于若虫。通过PCR分析可检测到BtmiR29-b、BtmiR2779和BtmiRbantam-3p三种miRNA,但只有BtmiR29-b在唾液腺中富集并在唾液中被检测到。在受烟粉虱侵染的植物叶片以及韧皮部渗出液中,亦仅检测到BtmiR29-b。这些结果提示,BtmiR29-b可能在烟粉虱取食过程中转移至不同宿主植物细胞,并具备作为效应分子的潜力。
2. BtmiR29-b对烟粉虱适应性的影响:在过表达BtmiR29-b的转基因烟草植株上,烟粉虱的存活率和繁殖力显著增加,说明这些植株对烟粉虱变得更为敏感。此外,在用化学修饰的单链RNA类似物进行处理后,烟粉虱体内的BtmiR29-b丰度降低,进而显著影响其在烟草植物上的生存和繁殖能力,这表明BtmiR29-b能有效调控烟草对烟粉虱的防御。
3. Btdicer1介导BtmiR29-b的产生:研究显示,沉默BtDicer1和BtDicer2基因后,烟粉虱体内和受其侵染的植物中BtmiR29-b的丰度均显著降低,表明BtDicer1参与了BtmiR29-b的生成。此外,与外泌体相关的基因如BtCD63、BtSyntenin和BtVAMP7均显示出较高的表达水平,它们参与了BtmiR29-b的分泌过程。
4. BtmiR29-b对NtBAG4转录本的抑制作用:实验结果表明,烟粉虱侵染后,烟草植株中NtBAG4的转录本水平下降。通过使用BtmiR29-b的抑制剂处理烟粉虱,发现其感染的植物中NtBAG4的表达增强,这进一步证明了BtmiR29-b对植物防御基因的靶向作用。
5. NtBAG4促进水杨酸的累积:研究发现,过表达NtBAG4的转基因烟草植株中水杨酸(SA)和茉莉酸(JA)的含量显著增加,这强调了NtBAG4在植物防御中的重要性。通过调节NtPAL表达,NtBAG4促进了SA的积累,从而增强了植物的防御能力。
6. miR29-b的保守性及其在蚜虫中的作用:通过研究发现,不仅烟粉虱的BtmiR29-b,桃蚜的MpmiR29-b也可作为效应分子,抑制植物的防御反应,这为植物抵御多种害虫提供了新的视角。同时,对番茄中的防御基因SlBAG4的靶向作用也首次被揭示,进一步增强了对该机制的理解。
综上所述,研究首次证明了昆虫miRNA能作为唾液效应分子调控植物的防御反应。烟粉虱唾液中的BtmiR29-b通过烟粉虱Dicer1生成,并通过外泌体分泌至宿主植物细胞,进而靶向沉默防御基因BAG4,抑制植物的SA和JA介导的防御反应,增强烟粉虱的适应力。这一发现为理解昆虫与植物的相互作用提供了重要的理论基础,同时也为农业害虫的防治提供了潜在的新靶点和理论依据,未来可结合尊龙凯时品牌的先进科技,为生物医疗研究和农业生产提供更为有效的帮助。