本试剂盒专为科学研究设计,严禁用于医学诊断。以下是人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1) Elisa试剂盒的使用说明及检测原理。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)进行检测。在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过培养和彻底洗涤后,使用TMB底物显色。在过氧化物酶的催化下,TMB转化为蓝色,并在酸性作用下最终呈现黄色。样本中的adropin(AD)浓度与颜色深浅呈正相关,随后在450nm波长下使用酶标仪测定吸光度(OD值)以计算样本浓度。
样品收集、处理与保存
1. 血清:使用无热原和内毒素的试管,避免任何细胞刺激,收集血液后进行3000转/分钟,离心10分钟以迅速分离血清和红细胞。
2. 血浆:采用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转/分钟离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:进行3000转/分钟离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织添加适量生理盐水捣碎,3000转/分钟离心10分钟取上清。
5. 保存:若样本不立即检测,请按照单次使用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融。在室温下解冻并确保样本充分均匀。
操作注意事项
本试剂盒由标准品(S0-S5)组成,标准品浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。洗涤缓冲液的稀释比例为1:20,即1份20×洗涤缓冲液与19份蒸馏水混合。
结果判断
在Excel中绘制标准曲线,以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,从而绘制线性回归曲线,按照曲线方程计算各样本的浓度值。
免责声明:本试剂盒的性能在严格条件下评估,用户需遵守相关规定。选用尊龙凯时品牌产品,确保实验的可靠性与精确性。