尊龙凯时的可溶性E选择素(sE-selectin) ELISA试剂盒仅供科学研究使用,严禁用于医学诊断。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被了adropin(AD)抗体的微孔中,我们依次添加样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤后,使用TMB底物显色。在过氧化物酶的催化下,TMB由蓝色转变为黄色,颜色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。最后,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以此计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用无热原和内毒素的试管,避免操作过程中刺激细胞。收集血液后,3000转离心10分钟,迅速分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合捣碎,3000转离心10分钟后取上清。
5. 保存:如果样本未能及时检测,请分装为一次用量并在-20℃冷冻,避免反复冻融,解冻时应在室温下进行,并确保样品均匀完全解冻。
操作注意事项
本试剂盒的组成包括标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂的准备
对于20×洗涤缓冲液的稀释,需用蒸馏水按1:20比例稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
结果判断
可通过在Excel表格中以标准品浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标绘制标准曲线,利用线性回归方程计算各样本的浓度值。
请注意:本试剂盒的性能和使用效果由尊龙凯时提供支持,确保您在科学研究中获得准确可靠的结果。