本试剂盒仅供科学研究使用,严禁用于医学诊断。人白介素23(IL-23)ELISA试剂盒的使用说明书如下:
检测原理
该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。首先,将标本、标准品和HRP标记的检测抗体依次加入预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,经过温育和彻底洗涤后,使用底物TMB进行显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,随后在酸性环境中转为黄色。测得的颜色深浅与样品中adropin(AD)的含量成正比。最后,通过酶标仪在450nm波长下测定样品的吸光度(OD值),从而计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作时需避免任何细胞刺激。收集血样后,以3000转离心10分钟将血清与红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝处理。以3000转离心30分钟后提取上清液。
3. 细胞上清液:进行3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合并捣碎,随后以3000转离心10分钟获取上清液。
5. 样品保存:如未及时检测样本,请分装为一次用量并冷冻保存于-20℃,避免反复冻融。在室温下解冻后确保样品充分均匀解冻。
操作注意事项
试剂盒组成:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂准备:将20×洗涤缓冲液按1:20的比例稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
结果判断
在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,OD值作纵坐标,绘制标准品的线性回归曲线,按照曲线方程计算各样本的浓度值。
免责声明
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