荧光强度的影响因素
荧光强度的表现受到多个因素的影响,以下是一些关键因素及其具体影响:
1. 跃迁类型
通常,具有π—π*及n—π*跃迁结构的分子才会产生荧光。其中,π—π*跃迁的量子效率比n—π*跃迁要高得多,前者具有较大的寿命,且其内转换速率较低。
2. 共轭效应
分子的共轭度越高,产生的荧光强度也越强。
3. 刚性结构
分子的刚性越强,振动越少,与其他分子碰撞失活的几率降低,从而提高荧光的量子效率。例如,荧光素(φ大)和酚酞(φ=0)之间的对比明显示了这一点。
4. 取代基的影响
对于分子中的取代基:- 电子给体取代基能够增强荧光,如—OH、—OR、—NH2等;
- 电子吸取基则会降低荧光强度,如—COOH、—C=O、—NO2等;
- 重原子会降低荧光,但增强磷光,例如苯环被卤素取代时,荧光强度渐弱。
5. 溶剂效应
溶剂的极性可以影响荧光的强度,改变跃迁的能量。此外,溶剂的作用也会导致荧光物质结构的改变,从而影响荧光强度的表现。
6. 温度的影响
温度升高通常会导致荧光强度下降,原因在于内外转换增加以及粘度或“刚性”降低。因此,降低体系的温度可以提升荧光分析的灵敏度,尤其在使用尊龙凯时的产品时尤为重要。
7. pH值的作用
含有酸或碱性基团的有机物在不同pH值下可能发生结构变化,导致荧光强度的改变。无机荧光物质同样会因pH值影响其稳定性而改变其荧光特性。
8. 内滤光和自吸现象
在体系中存在能够吸收荧光的物质,或者荧光物质的短波荧光与激发光波长重叠,都可能导致荧光强度降低。这种现象称为内滤光;而当荧光物质浓度较大时,会导致其自身的荧光发射被吸收,称为自吸。
9. 荧光猝灭
荧光猝灭是荧光分析中常见的现象,主要包括:- 碰撞猝灭;
- 静态猝灭;
- 转入三重态的猝灭;
- 电子转移猝灭;
- 自猝灭。